Die Line of Scrimmage ist die imaginäre Linie über die gesamte Breite des Spielfelds, an der sich Offense und Defense vor jedem Spielzug gegenüberstehen. Sie wird durch die Position des Balls bestimmt und markiert den Startpunkt jedes neuen Spielzugs.

Beide Teams dürfen die Line of Scrimmage vor dem Snap nicht überqueren. Tut es ein Spieler trotzdem, ist das eine Strafe. Für die Offense heißt es False Start (fünf Yards Strafe), für die Defense Offside (ebenfalls fünf Yards). Diese Regel sorgt dafür, dass jeder Spielzug fair beginnt. In der Praxis versuchen beide Seiten, so nah wie möglich an die Linie heranzukommen, ohne sie zu überqueren.

Für die Offense ist die Line of Scrimmage wichtig, weil sie bestimmt, wer den Ball fangen darf. Offensive Linemen, die an der Line stehen, dürfen keinen Vorwärtspass fangen. Nur Spieler, die hinter der Line oder am Ende der Line stehen, sind passberechtigte Empfänger. Diese Regel beeinflusst die gesamte Aufstellung der Offense.

Im TV wird die Line of Scrimmage als blaue Linie auf dem Bildschirm eingeblendet. Die gelbe Linie zeigt, wie weit die Offense für einen First Down kommen muss. Beide Linien existieren nur in der Fernsehgrafik und sind auf dem echten Spielfeld nicht sichtbar.